飼料粗脂肪的測定方法【教學目標】

1.學會各種飼料樣本的粗脂肪的方法。

2.學會儀器的使用

【教學重點】樣本的測定方法。

【教學方法】操作指導

【課時分配】6學時

【原理】索氏脂肪提取器中用提取試樣，稱提取物的重量，除脂肪外還有有機酸，磷脂、脂溶性Vit，葉綠素等，因而測定結果稱粗脂肪或提取物。

【分析步驟】

1）仲裁法使用索氏脂肪提取器測定。

索氏提取器應干燥無水。抽提瓶(內有沸石數粒)在105℃±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷卻30min，稱重。再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次重量之差小于0.0008g為恒重。

稱取試樣1～5g(準確至0.0002g)，于濾紙筒中，或用濾紙包好，放入105℃±2℃烘箱中，烘干120min(或稱測水分后的干試樣，折算成風干樣重)，濾紙筒應高于提取器虹吸管的高度，濾紙包長度應以可全部浸泡于中為準。將濾紙筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加無水60～100mL，在60～75℃的水浴(用蒸餾水)上加熱，使回流，控制回流次數為每小時約10次，共回流約50次(含油高的試樣約70次)或檢查抽提管流出的揮發后不留下油跡為抽提終點。

取出試樣，仍用原提取器回收直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去殘余。擦凈瓶外壁。將抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷卻30min稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次重量之差小于O.OOlg為恒重。

2）結果計算

式中：m ——風干試樣重量，g。

m₁ ——已恒重的抽提瓶重量，g。

m₂——己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。

3）推薦法

⑴魯氏殘留法

①操作步驟

a.將脫脂濾紙裁成10×10cm²大小，疊成一邊不封口的紙包，用鉛筆編號，按順序排列于培養皿上，置于105℃土2℃烘箱中烘2h，取出放于干燥器中冷卻至室溫，分別放入同一稱量瓶中稱重(m₀，g)。

b.將2～5g風干樣品(通過40目篩)用小藥匙小心裝入已經稱重的紙包中，封上包口。

飼料粗脂肪的測定方法按順序排列于培養皿中。置于105℃±2℃烘箱中烘3h，取出放入干燥器中冷卻至室溫，分別放入原稱量瓶中，稱至恒重(m₁，g)。將樣品包放入抽提管中，倒入無水，使之剛超過樣品包高度，浸泡過夜。然后將浸泡過樣品的無水放入抽提瓶中，再重新向抽提管中倒入無水，使之*浸沒樣品包。連接裝置，接通冷凝水，在70～80℃水浴鍋中回流6～8h，回流速度以每分鐘20mL左右為宜。抽提完畢，取出樣品包，在通風處揮干．剩余可進行回收。

c.將樣品包仍按原序號排列在培養皿中，置于105℃±2℃烘箱中烘2h，取出放入干燥器中冷卻至室溫，再將樣品包放原稱量瓶中，稱至恒重(m₂，g)。

主要特征:

1、加熱抽提，溶劑回收和冷卻三大部分組成；

2、脂肪測定儀操作時可以根據試劑沸點和環境溫度不同而調節加熱溫度；

3、試樣在抽提過程反復浸泡及抽提，從而達到快速提取目的；

4、可自動回收溶劑，大大方便了用戶的使用，并節約了很多時間；

5、抽提時間可調，到時報警。

飼料粗脂肪的測定方法技術參數:

飼料粗脂肪的測定方法②結果計算

粗脂肪＝  m₁－m₂×100%

          m₁－m₀

式中，m₀——濾紙＋稱量瓶重（g）；

m₁——提取前樣品包＋稱量瓶重（g）；

m₂——提取后樣品包＋稱量瓶重（g）。

上述兩種方法都是以為溶劑的提取方法，其優點是具有的準確度和精密度，尤其是測定粗脂肪含量在5%以下的樣品，用此法比較可靠。缺點是費工費時，反復提取需8～16h；另外不能將樣品中的全部脂肪提盡。這是因為部分脂肪常與蛋白質或碳水化合物等非脂肪成分結合。成為結合態脂類，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同時樣品也必須是烘干的，因難以滲入含水樣品的組織內部。在烘干樣品時，又應考慮到脂肪在高溫下易被空氣氧化等情況。

⑵脂肪測定儀

①操作步驟

a.打開恒溫加熱裝置開關，控制工作溫度為75℃。

b.用萬分之一分析天平稱2g左右的樣品(準確至0.0002g) (m₁)，放入濾紙筒內烘干。

c.用套筒夾將6個濾紙套筒裝入浸提冷凝管內，當確信套筒已被磁鐵吸牢后取下套簡夾。

d.用分析天平稱浸提杯重量(m₂)，然后加入約50mL無水，用杯托將6個浸提杯放在加熱板上，再將冷凝管提升機構搬下，使浸提懷與冷凝管連接好。

e.事先接通浸提冷凝管的冷卻水，將濾紙筒置于“沸騰”位置。冷凝管應有良好的冷凝作用；

f.無水沸騰15min或30min(依樣品含油量而異)后，將濾紙筒提升到“沖洗”位置，沖洗30min或45min。

g.沖洗結束后，關閉冷凝管旋塞閥，回收。

h.松開冷凝管提升機構，取下浸提杯，并放入烘箱烘干。

i.在干燥器中冷卻浸提杯，然后用分析天平稱重(m₃)。

j.按以下公式計算樣品中粗脂肪含量。

②測定結果的計算

粗脂肪＝W₃－W₂×100%

                  W₁

式中 ：W₁——風干試樣重量，g。

W₂ ——已恒重的浸提杯重量，g。

W₃——己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量，g。

6.3.3.7  重復性每個試樣取兩平行樣進行測定，以其算術平均值為結果。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允許相對偏差為3%。粗脂肪含量在10%以下時，允許相對偏差為5%。

【實訓作業及思考題】

1.測定混合飼料、配合飼料、濃縮飼料或單一飼料中粗脂肪的含量，并寫出實訓報告。

2.脂肪包的高度超過虹吸高度對測定結果有何影響？為什么？

3.脂肪測定儀對飼料脂肪的測定有何優點?

4.對測定zui后放入105℃±2℃烘箱中需干燥的包、瓶或杯有何要求？

5.測定zui后包、瓶或杯在105℃±2℃烘箱內的干燥時間為什么不能過長?過長是否會影響測定結果?

飼料粗脂肪的測定方法（索氏提取器脂肪測定儀）參考資料：杭州聚同電子有限公司